第八百八十五章 烏骨藤作用

讓人意外的事情是，這個人的聲音不是來自已經有點着急的楊光，也不是來自本來就起脾氣不好的劉教授。

而是來自於陳浩然。

陳浩然說出這樣的話，讓在場眾人，瞬間感覺到不可思議。

簡直讓人不敢相信。

為什麼他會說出這樣的話？

“陳家主他怎麼了？”

“這件事情太重要了吧，重要到連陳家主都淡定不了，簡直是……讓人真的不可能很淡定啊！”

在場的十三世家的人交頭接耳，紛紛說道。

顯然，鍾醫也沒有預料到這個狀況，他深深的看了一眼陳浩然，語氣堅定地說道。

“重點！重點就是烏骨藤！

烏骨藤——是蘿蓐科植物通關藤的藤、根或葉，具有止咳平喘、散結止痛、清熱解毒功效，民間主要用於消炎、祛腫等。

通過我的研究表明，其含有甾體、三萜、揮髮油、多糖等化學成分，具有抗癌、平喘、降壓、抑菌、免疫調節、保肝利尿等作用。

其提取物的純化中藥製劑已經商品化，主要用於消炎、平喘、抗癌，但其活性成分及藥理作用機制仍有待進一步深入研究。

雲南藥廠的張秋廠長一定知道，在那裏的紅河州金平、元陽、箇舊、蒙自等地均有烏骨藤分佈，為充分開發利用該資源，本實驗對其化學成分進行研究。

當然，這一次，我們也是經過了嚴格的藥材、儀器和試劑的測試的。

我們所採用的藥材烏骨藤，都是采自雲南省箇舊市賈沙鄉水塘村，鑒定為蘿蓐科植物通關藤的藤、根或葉。

儀器我採用的是X．500核磁共振儀。

HERAcellC02細胞培養箱、MuhiskanSpectrum酶標儀。

薄層色譜矽膠GF254、柱色譜矽膠。SephadexLH-20凝膠。AB-8吸附樹脂。

8ODS—A矽膠。甲醇為色譜純。其他試劑均為分析純。

而所用的試劑是來自上海碧雲天生物技術有限公司的CCK-8。美國Sigma公司的DMSO。胎牛血清、RPMI1640、P／S、Try。96孔細胞培養板。

還有人胃癌細胞MNK-45、SGC-7901。5-氟尿嘧啶注射液。

實驗方法是，首先提取與分離取乾燥烏骨藤5千克，粉碎，百分之80乙醇迴流提取3次(分別是4、3、3小時)。

然後，合併提取液，減壓濃縮，得浸膏213克，加水溶解，石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分別萃取3次，減壓回收溶劑。

得到石油醚部位15克、氯仿部位15克、乙酸乙酯部位27克、正丁醇部位42克

。氯仿部位以氯仿一甲醇梯度洗脫，得到藥物標誌物1—3，經反覆矽膠柱層析，分別得到化合物9(10毫克)、1(14毫克)、6(24毫克)。

乙酸乙酯部位以石油醚-丙酮梯度洗脫，得到流份實驗標誌物1～4，其中實驗標誌物1步矽膠柱層析，得到化合物1(65毫克)。

實驗標誌物3經反覆矽膠柱層析和SephadexLH-20凝膠柱純化，得到化合物7(35毫克)和8(26毫克)。

正丁醇部位以氯仿一甲醇梯度洗脫，得到流份實驗標誌物1～4，其中實驗標誌物1經反覆矽膠柱層析，得到化合物5(51毫克)。

實驗標誌物4上ODS柱，甲醇一水梯度洗脫，再經SephadexLH-20凝膠柱純化，得到化合物2(42毫克)、3(57毫克)、4(73毫克)。

既然我覺得它有用，那麼我們採用抗腫瘤活性實驗法進行實驗。

首先，細胞接種用含百分之10胎牛血清的RPMI1640培養液培養MNK-45和SGC一7901，收集對數生長期細胞，消化后調整其懸液濃度，以每孔1×104個細胞接種於96孑L板，每孔200trL。

細胞培養將細胞板放人CO：孵箱中，在37攝氏度、百分之5CO，條件下培養24小時，當細胞達到80％～90％匯合度時，棄去培養基。

接下來，就是細胞給葯。

我們將將樣品用DMSO溶解后，按200、100、50、25、12．5克／毫升質量濃度加人細胞孔內，重複3批，並另加3孔作為陽性對照(5-氟尿嘧啶)組。

3孔作為DMSO對照組，每孔總體積100止，在酶聯免疫檢測儀上測定各孑L吸光度，計算細胞抑制率、

公式為抑制率=(1一加藥細胞吸光度／對照細胞吸光度)×100％。再採用Logit法計算IC。

然後是實驗結果。

結構鑒定分別有化合物1：白色無定形粉末(甲醇)。

化合物2：白色粉末(氯仿)，化合物3:針狀結晶(甲醇)。化合物4：黃色粉末(甲醇)。化合物5：黃色針晶(甲醇)化合物6：黃色粉末(甲醇)，化合物7：無色針狀結晶(氯仿)，化合物8：白色粉末(甲醇)。

我們這裏能夠看出，LC與谷甾醇對照品Rf值及顏色一致，混合熔點不下降，故鑒定該化合物為p一谷甾醇。

TLC與胡蘿蔔苷對照品Rf值及顏色一致，混合熔點不下降，故鑒定該化合物為胡蘿蔔苷。

還有就是抗腫瘤活性。

根據實驗效果顯示，山柰酚對MKN-45和SGC-7901的抑制作用較強，IC50分別為48．87。

這個結果，遠遠高於陽性對照(5-氟尿嘧啶)。

而山柰酚4—甲醚、烏骨藤苷H、I活性較強。

所以，我們能夠清楚的得到了結果。

目前，關於烏骨藤提取物抗胃癌活性的報道主要集中在水提物和甾體化合。

而這一次的實驗採用人胃癌細胞SGC7901和MKN45，對該植物中分得的化合物進行體外抗腫瘤活性實驗，發現黃酮類成分山柰酚對兩者均表現出明顯的抑制作用。

我這一次的實驗表明，其能夠通過作用於SGC7901的活性氧代謝途徑來誘發細胞溶血，從而產生抗增殖活性。

當然，這一次尚無對MKN45作用機制進行研究，故需要更深入的探索，以期為開發利用烏骨藤提供科學依據。

這項研究，單憑我一個人肯定是難以完成的，所以，我想要……”

還沒有等鍾醫說完，甚至鍾醫都沒有沒有表達出什麼想法的時候，一個聲音急迫的表示了自己的意願。

“我可以！我真的可以！鍾醫，我可以幫你，不，我可以給你打下手，進行這些實驗標誌物的進一步開發。”

楊光毫不猶豫地表達道。