第 十三章 驗證

第二天，王靜姝打算驗證這套試劑盒的真假，昨晚上睡前她已經把實驗設計好了，現在她在記錄本上寫下步驟，然後就開始實驗。王靜姝習慣在實驗前把步驟先寫一遍，邊寫邊在腦海里預演接下來的實驗，每一個實驗都要做最好的準備，確保實驗過程不出問題。

原本實驗預期結果是對照組沒有表達，而實驗組根據藥物濃度不同也許表達量會有變化，但是昨天的結果確是實驗組和對照組的數據都差不多，對照標準曲線，各組的表達量還不低。她確定自己沒有加錯樣品，也沒有互相污染，但這樣的結果讓她不得不對自己的記憶產生懷疑。因此，這一次她乾脆使用基因水平PCR驗證過沒有表達L因子的細胞C來做實驗，這樣無論如何也不會被污染。

實驗前樣品會用試劑盒自帶稀釋液稀釋A，那麼再取其他幾種替代稀釋液的試劑，PBS緩衝液、1640細胞培養基和其他合格ELISA試劑盒的稀釋液B。

單純稀釋液不加樣品組：A，PBS，1640，B；

稀釋液加樣品C上清液組：A+C，PBS+才，1640+C，B+C。

每組各設復孔。

設定好分組，接着就是按照步驟一步一步來了。

先是加入上上述分組的各溶液孵育2小時，洗滌后在加帶標記抗體孵育2小時。第二次孵育時剛好可以吃午飯了。

期間，她又做了些別的實驗。後來她打開電腦查看郵箱，之前構建的質粒，酶切正確的送去測序，結果應該回來了。

果然，一般來說酶切正確的質粒基本上就沒問題了，但那只是間接證明DNA條帶大小符合，而測序則是直接證明條帶的每一個鹼基都是否一致。

如此，她就該擴大帶質粒的大腸桿菌培養，然後提取較多的質粒用以接下去的實驗。之前保存了帶質粒的大腸桿菌菌種，直接化凍，接種到液體LB培養基中，然後放在恆溫搖床里培養。當然這一步現在做早了，晚上的時候再接種，然後在搖床培養過夜，第二天，提取質粒。

下午大約2點的時候，上午開始做的ELISA就可以上酶標儀檢測了。王靜姝又期待又忐忑的操作起酶標儀。

結果出來了，除了標準品組，用試劑盒自帶稀釋液的A組和A+C組都顯色，且數值相近！而其他組都沒有顯色！

也就是說問題就出在稀釋液了，稀釋液里存在一種抗原能夠跟包被抗體和標記抗體結合。她現在基本上推測這個試劑盒是假的了，裏面的抗體和標準品（對應抗原）極有可能選用某種常見的便宜的抗原抗體。得出這樣的結論還需要做一個實驗。

必須用含有L因子的細胞上清液來驗證。如果含有L因子的上清加稀釋液A顯色，不加則不顯色，那麼確定這套ELISA體系裏的抗體絕對不是L因子的抗體。

不過目前她還沒有確定L因子一定會分泌到細胞外，因此她雖然構建了過表達L的細胞系，但取其上清液如果沒有顯色，也不能夠說明問題。

但還有另一個辦法，她已經訂購了一支L因子抗體兔-Anti-L，應該過幾天就到了，到時候可以用該試劑盒的+標準品+Anti-L+標記抗兔二抗，若結果沒有顯色則說明標準品不是L因子。這個到時候在做了，現在的結果也足以說明問題，至少稀釋液有問題是百分百肯定的，她必須整理一下實驗數據，發給孫老師，看他怎麼說。

孫書淮看到實驗結果后，問她：“這試劑盒哪買的？”

王靜姝遞過試劑請購單，上面謝了試劑貨號、名稱、品牌、代理商、規格、購買量、價格等信息還有購買人王靜姝的簽名，小組長李河的簽名以及孫書淮教授的簽名。

“這家代理商以前我們在他們那買過試劑沒有？”

“好像很少，也就是這兩個月的事，他們的銷售人員好像也是兩個月前才來我們實驗室推銷。之前他們給了我們送了一點白介素6的試用裝，好像是沒有問題的。”王靜姝遞過一張名片，還有幾張產品目錄。

“他們的產品很齊全，而且價格比其他地方要優惠一些。其實主要還是之前他們送的白介素6試用裝沒有問題。”

“這真是害人不淺哪，你這一批細胞處理了多久了。”

“這一批細胞處理快兩個月了，這個節點預測可能要開始表達了。”

“那不是這兩個月都白做了。”

“倒也還好，我細胞每個星期處理一批新的，馬上下周又可以檢測了。只是現在要重新訂購，還要等試劑，那我這些細胞只能先設計做別的實驗了。不能浪費。”

“那影響也很大了。那你現在要趕緊再訂一個試劑盒，找一家可靠的代理商購買，這個你去問姜瓊，或者看能不能直接到官網上訂購。”

“然後你聯繫他們銷售員，把實驗結果跟他們說，看他們怎麼辦。”孫書淮又補充了一句。

“讓他們退錢並賠償損失嗎？”王靜姝問道。

“你把他喊過來，到時候你和錢丹一起跟他談。”

下午的時候，林君和親自送晚飯來實驗室。

“實驗做了嗎？”

“做了，看來被你說中了。”

“那你打算怎麼辦？”

“還能怎麼辦，訂購新試劑唄。然後再找他們談，看是退錢還是賠償啥的。”

“沒了？”

“嗯……到時候看他們態度怎麼樣吧，反正錢丹會跟他談。”

做科研的人還是要有一顆大心臟，因為失敗是家常便飯。雖然說往常實驗也常有失敗，但跟這次不一樣，這次是試劑的鍋，實驗被這樣搞砸了還是有點鬱悶。

因此，這個時候，她說話都有點有氣無力的樣子。

林君和看着她的樣子，心裏很是心疼。

‘聽說，今天晚上，月亮洲會放煙花。”

“放煙花？為什麼，今天又不是什麼節日？”

“這個我也不清楚，不過管那麼多幹嘛，有的看就好，不是嗎？”

“那確實。我要在群里說一聲，看有沒有人一起去看。”

中心實驗室聊天群。

王靜姝：今天晚上，據說月亮洲放煙花，有沒有人一起去看？

袁元圓：真的嗎？咱倆一起去吧！

段青竹：@袁元圓，人家男朋友都來了，還會跟你去？[幸災樂禍表情]

袁元圓：嚶嚶嚶，我被拋棄了

陶夭：哇，和男朋友一起看煙花，好浪漫啊[星星眼]，異地狗受到一萬點傷害，嚶嚶嚶

王靜姝：……